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蓝白斑筛选原理图(蓝白斑筛选原理)

朱华德
导读 大家好,我是小一,我来为大家解答以上问题。蓝白斑筛选原理图,蓝白斑筛选原理很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、新产品构思筛

大家好,我是小一,我来为大家解答以上问题。蓝白斑筛选原理图,蓝白斑筛选原理很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、新产品构思筛选是采用适当的评价系统及科学的评价方法对各种构思进行分析比较,从中把最有希望的设想挑选出来的一个过程。

2、筛选一般要经过两个步骤。

3、 第一步是初选。

4、经过初选,把那些不符合市场要求、或不符合企业目标、或企业力量暂时达不到的构思加以淘汰,以减少构思数量。

5、第二步是精选。

6、对初选留下来的构思方案,从不同角度加以分析,进行详细的评审,全面比较衡量它们的利弊,从中选出最佳的构思方案。

7、在筛选时要防止两种失误:一是误舍,即在没有经过认真深入分析的情况下,轻率舍弃了有潜力、有前途、有价值的构思,以至失去机会;二是误取,即在评估不准确的情况下,仓促选定没有发展前途的或企业力量难以达到的构思,以至造成浪费。

8、 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。

9、现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。

10、在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。

11、因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。

12、这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。

13、由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。

14、然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。

15、这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。

16、如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。

本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。